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關(guān)于兒茶酚胺

嗜鉻細(xì)胞瘤（Pheochromocytoma）是一種罕見疾病，每10萬人中的年診斷率為1~2例。嗜鉻細(xì)胞瘤會(huì)引起兒茶酚胺的分泌增加，其血漿濃度測(cè)定可為臨床高血壓診治和嗜鉻細(xì)胞瘤診斷定位提供有力數(shù)據(jù)支撐。當(dāng)它的含量發(fā)生顯著變化時(shí)，就代表人體出現(xiàn)了病態(tài)。

隨著分析科學(xué)的蓬勃發(fā)展，人們對(duì)兒茶酚胺的研究更加深入，目前最常見的有液相色譜法、氣相色譜法、熒光法等，由于樣本的基質(zhì)為人體血漿，成分復(fù)雜，故樣品前處理的提取和凈化尤為重要。

普敦科技對(duì)此提出相應(yīng)解決方案

使用磁性固相萃取劑，搭配AUTO M32全自動(dòng)提取儀，結(jié)合液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定血漿中的E、NE、DA、MN、NMN和3-MT。兒茶酚胺及其代謝物均為堿性強(qiáng)極性化合物，使用離子交換原理的WCX Plus磁性固相萃取劑進(jìn)行提取和凈化。

分離純化過程

WCX Plus磁性固相萃取劑鍵合了羧酸根基團(tuán)，在溶劑體系pH值中性或偏堿性條件下電離并帶負(fù)電荷，以電荷吸引作用吸附目標(biāo)化合物正離子[ M ]⁺達(dá)到捕集的效果。通過調(diào)節(jié)溶劑pH值至3以下時(shí)，羧酸根飽和而處于電中性，失去電荷吸引的[ M ]⁺被洗脫至溶劑中，從而實(shí)現(xiàn)與雜質(zhì)的分離純化。

磁性固相萃取

移取對(duì)應(yīng)溶劑于專用96孔板內(nèi)，并設(shè)定AUTO M32全自動(dòng)提取儀方法，運(yùn)行樣品進(jìn)行磁性固相萃取。完成后，取洗脫液注入LC-MS/MS測(cè)試。

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

取某正常人血漿，添加六種兒茶酚胺類目標(biāo)物，兩次平行處理。所得回收率95.2-116%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1.4-9.3%。

取血漿濃度為0.2ng/mL（3-MT，0.02ng/mL）標(biāo)準(zhǔn)樣品平行處理六次，內(nèi)標(biāo)峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差4.4-9.7%。

六種兒茶酚胺類標(biāo)準(zhǔn)曲線線性及其準(zhǔn)確度

綜上數(shù)據(jù)可以看出，使用WCX Plus磁性固相萃取劑，結(jié)合AUTO M32全自動(dòng)提取系統(tǒng)，提取和凈化血漿中兒茶酚胺類目標(biāo)物。經(jīng)LC-MS/MS分析測(cè)試，線性良好，結(jié)果準(zhǔn)確精密，符合基本定量測(cè)試的方法學(xué)要求。

同時(shí)，大幅度減少傳統(tǒng)SPE的移液操作和人為實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，節(jié)約了人力及時(shí)間成本，并顯著降低了人為因素在前處理中的影響。

AUTO M32全自動(dòng)提取儀